细胞增殖 - 资源检索 - 将博数字资源平台

周期性张应变在调控VSMCs迁移和增殖中的作用及其机制

目的:血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖、凋亡、迁移异常和细胞外基质增加是血管重建(remodeling)主要表现之一。在体情况下,VSMCs主要承载由脉动血压产生的周期性张应变的作用。本研究拟观察周期性张应变在调控VSMCs增殖和迁移中的作用并探讨其可能的信号通路。方法:应用FX-4000T细胞张应变加载系统,对体外培养大鼠胸主动脉VSMCs施加5%(正常)和15%(异常增高)牵张幅度的周期性张应变,加载频率为1.25 Hz,时间为24 h,以未加载的细胞为静态对照组。应用Transwell检测细胞迁移能力;BrdU ELISA检测细胞增殖;Western blot检测细胞信号分子Rho-GDIα、phospho-Rac1、phospho-P38、phospho-Akt及phospho-ERK1/2表达水平。然后,应用RNA干扰技术和特异性抑制剂检测上述细胞信号分子在周期性张应变调控VSMCs迁移和增殖中的作用,并应用细胞免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测Rho-GDIα对VSMCs细胞骨架聚集和局部黏着斑形成的影响。结果:与静态组...

BMP-7对TGF-β_1诱导的人肾小管上皮细胞损伤的保护作用研究

目的观察骨成形蛋白-7(BMP-7)对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞增殖、转分化以及分泌细胞外基质(ECM)的影响,探讨BMP-7拮抗TGF—β1致肾间质纤维化的作用及其可能机制。方法应用MTT比色法测定BMP-7对人肾小管上皮细胞增殖作用;间接免疫荧光法和RT-PCR测定人肾小管上皮细胞α—SMA、角蛋白、波形蛋白mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测α—SMA阳性的HK-2细胞百分率。构建BMP-7全长基因表达质粒,脂质体介导方法将重组表

小肠粘膜下层与骨髓基质干细胞联合培养的实验研究

关键词：小肠粘膜下层骨髓干细胞生物相容性材料

目的通过对山羊骨髓基质干细胞(BMSCs)与小肠粘膜下层(SIS)的体外复合培养,探讨SIS 作为骨组织工程支架材料的可行性,为应用组织工程方法修复骨缺损提供实验依据。方法将山羊BMSCs 在体外培养至第三代生长旺盛时接种到预湿的SIS 上(接种密度为2×10~6/ml),相同条件下进行复合培养(均为成骨诱导培养液),实验分细胞+材料(BMSCs+SIS)组及单纯细胞(BMSCs)组,培养3-7天后通过相差显微镜、光镜、电镜及组织学切片等方法观察细胞在材料上的生长情况,行四唑盐MTT 法检测细胞增殖情况,磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。通过对照实验研究,对BMSCs 与SIS 复合培养后的细胞活性及成骨性能进行评价。结果BMSCs 与SIS 复合培养后5-7天,相差显微镜下可见SIS 材料边缘有多量梭形细胞呈辐射状聚集生长,细胞形态良好,可见核分裂相;电镜下可见细胞数量较多,细胞伸展成梭形或多角形,见伪足及微绒毛,细胞表面有颗粒状钙盐沉积;组织块HE 染色可见材料表面有细胞贴附,形态良好。MTT 法测定结果表明,BMSCs 复合至SIS 后生长活性与单纯细胞组无差别;碱性磷酸酶(ALP)活性检测也显...

雷公藤蒽醌成分大黄素对小鼠迟发型超敏反应及脾淋巴细胞增殖反应的影响

关键词：雷公藤大黄素免疫抑制

目的观察体外具有抑制T淋巴细胞增殖活性的雷公藤蒽醌成分大黄素是否在体内具有免疫抑制活性作用。方法腹腔给药,观察大黄素对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响。同时,采用~3H-甲基胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法,观察大黄素体内给药后小鼠脾淋巴细胞对Con A诱导的T细胞以及脂多糖(LPS)诱导的B细胞增殖反应中的影响。结果大黄素腹腔给药对二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型超敏反应有显著抑制作用,给药后小鼠脾淋巴细胞对丝裂原诱导的增殖反应能力明显低下。结论大黄素具有较强的免疫抑制活性。

SUMO2/3特异蛋白酶SENP3对PML的de-SUMO介导氧化应激条件下的细胞增殖

关键词：氧化应激 SUMO2/3 SENP3 PML 细胞增殖

SUMO 家族包括 SUMO-1、2、3、4,对细胞内许多蛋白质进行可逆的共价修饰-SUMO 化。抑癌蛋白 PML 的 SUMO-1修饰与 PML 在核体内的定位和核体形成有关,因而也对 PML 蛋白发挥抑癌基因功能至关重要。催化 SUMO 化的逆向反应 de-SUMO 化的是 SUMO 特异性蛋白酶(SUMO/sentrin-specific proteases)

泛素样蛋白NEDD8对乳腺癌相关蛋白3(BCA3)的修饰及BCA3对NFκB活性的抑制

蛋白质的泛素样修饰对蛋白质功能调控有重要意义。NEDD8(neural precursor cell-expressed developmentally down-regulated)是近年发现的一种泛素样小分子蛋白。NEDD8修饰系统对细胞增殖、发育有重要作用,但NEDD8的靶蛋白目前仅发现P53、Mdm2、pVHL和Cullin家族。寻找更多的 NEDD8靶蛋白成为目前研究的热点。NEDD8修饰是可逆的,NEDD8特异的蛋白酶,SENP8,可以把NEDD8从它的靶蛋白上水解去除。本研究以SENP8为诱饵,利用酵母双杂交技术,并通过 GST-pull down实验和在体免疫沉淀发现SENP8和乳腺癌相关蛋白3(breast cancer associated protein 3,BCA3)相互作用。在此基础上我们发现,NEDD8确实可以修饰BCA3,而SENP8可以逆转BCA3 的NEDD8修饰;NEDD8修饰是非特异地发生于BCA3的11个lysine上的;BCA3的NEDD8修饰发生于染色质。进一步研究显示,BCA3可以作为NF kB的共抑制者(co-repressor),抑制TNF α诱导的NF...

抗CD3抗体诱导的新生儿脐带血淋巴细胞信号传导的研究

关键词：新生儿脐带血信号传导淋巴细胞

目的从TCR/CD3复合物信号传导的角度,研究抗CD3抗体、PMA和Iomomycin对新生儿脐带血淋巴细胞增殖及胞内钙离子浓度的影响,以及与PLCγ1表达的关系。方法利用[~3H]TdR掺入法检测淋巴细胞的DNA合成;利用荧光分光光度法检测淋巴细胞内钙离子浓度;利用蛋白印迹法检测PLCγ1的表达。结果应用抗CD3抗体或PMA+Ionomycin协同处理新生儿脐带血和成人外周血淋巴细胞,其DNA合成和胞内钙离子浓度均明显增高,并且新生儿脐带血淋巴细胞的DNA合成和胞内钙离子浓度明显低于成人外周血水平。但是,与抗CD3抗体相比,PMA+Ionomycin协同所诱导的新生儿脐带血淋巴细胞的增殖虽达不到成人外周血水平,但更接近成人外周血水平。抗CD3抗体处理前后的新生儿脐带血淋巴细胞PLCγ1的表达均明显低于成人外周血水平。结论新生儿脐带血淋巴细胞信号传导发育的不完善可能主要存在于细胞活化的早期阶段,并且这种不完善的原因可能与PLCγ1表达降低以及不能有效地被激活有关。

三氧化二砷对肾细胞作用的实验研究

目的:通过体外实验研究三氧化二砷对肾细胞增殖与凋亡的影响,旨在探索三氧化二砷干预肾脏疾病发展的可能及价值。方法:选择三种肾细胞为实验对象:人肾间质成纤维细胞、鼠肾系膜细胞株STL和袋鼠近端小管小管细胞株OK。

小檗碱对人食管鳞癌细胞的遗传毒性及生长抑制作用

关键词：小檗碱食管鳞癌细胞周期停滞 H2AX磷酸化 c-myc

目的探讨小檗碱(berberine,Ber)对人食管鳞癌细胞株EC9706的生长抑制作用及其作用机制。材料与方法:用Ber作用E9706细胞后,采用光学显微镜观察细胞形态学变化,用MTT法检测不同浓度Ber在不同时间对EC9706细胞增殖的影响;采用TUNEL法和流式细胞仪Annexin-V Alexa 488/PI法检测Ber对EC9706细胞凋亡的影响;PI染色法检测经Ber作用后EC9706细胞周期分布的改变;用Western blotting检测Ber对EC9706细胞p53,c-myc,cyclin D1蛋白表达的影响;用免疫荧光方法检测由DNA双链断裂引起的H2AX磷酸化。结果Ber体外能显著抑制EC9706细胞的生长增殖,其抑制作用与药物浓度及作用时间呈正相关关系,作用48h EC9706细胞IC_(50)值约为50μM;Ber作用后DNA双链断裂明显升高,G2/M期细胞比例显著上调,但凋亡现象不明显;同时实验还发现Ber可以明显上调p53的表达并抑制c-myc和cyclin D1蛋白表达。结论Ber可诱发DNA损伤,并可通过细胞G2/M期阻滞而明显抑制EC9706细胞的增殖,上调野生型p53蛋...

Stat3介导G-CSF对原代APL细胞增殖的调控作用

关键词：G-CSF IL-1β STAT1α STAT3

目的:探讨ATRA诱导后,IL-1β和G-CSF对原代APL细胞增殖调控的信号传导因子。方法:显微镜下直接计数原代APL细胞的增殖性变化。采用酶联免疫ELISA法测定原代APL细胞培养上清IL-1β和G-CSF水平的变化,RT-PCR方法测定IL-1β和G-CSF mRNA表达水平。Western blot测定 STAT1α和STAT3表达水平变化。

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