干细胞
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关键词:小肠粘膜下层 骨髓 干细胞 生物相容性材料
目的通过对山羊骨髓基质干细胞(BMSCs)与小肠粘膜下层(SIS)的体外复合培养,探讨SIS 作为骨组织工程支架材料的可行性,为应用组织工程方法修复骨缺损提供实验依据。方法将山羊BMSCs 在体外培养至第三代生长旺盛时接种到预湿的SIS 上(接种密度为2×10~6/ml),相同条件下进行复合培养(均为成骨诱导培养液),实验分细胞+材料(BMSCs+SIS)组及单纯细胞(BMSCs)组,培养3-7天后通过相差显微镜、光镜、电镜及组织学切片等方法观察细胞在材料上的生长情况,行四唑盐MTT 法检测细胞增殖情况,磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。通过对照实验研究,对BMSCs 与SIS 复合培养后的细胞活性及成骨性能进行评价。结果BMSCs 与SIS 复合培养后5-7天,相差显微镜下可见SIS 材料边缘有多量梭形细胞呈辐射状聚集生长,细胞形态良好,可见核分裂相;电镜下可见细胞数量较多,细胞伸展成梭形或多角形,见伪足及微绒毛,细胞表面有颗粒状钙盐沉积;组织块HE 染色可见材料表面有细胞贴附,形态良好。MTT 法测定结果表明,BMSCs 复合至SIS 后生长活性与单纯细胞组无差别;碱性磷酸酶(ALP)活性检测也显...
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目的以聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)包裹特定形态的医用假体材料--多孔高密度聚乙烯(high-density polyethylene,HDPE,商品名为MEDPOR)为支架,应用软骨细胞诱导骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),探讨共培养构建特定形态带内支撑组织工程化软骨医用假体的可能性。方法以直径3mm、长5mm的圆柱状MEDPOR外裹1mm厚PGA为支架,将体外分别培养的新生猪耳郭软骨细胞和BMSCs按7:3的比例混合,以10×107/ml的细胞浓度接种于支架,同时以相同浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSCs分别接种作为阳性对照和阴性对照。经体外培养2周及裸鼠皮下移植4周、8周后取材,行大体观察、组织学、组织化学及免疫组化检测。结果各组细胞均与材料粘附良好。共培养组和阳性对照组均形成了大体形态良好的MEDPOR-软骨复合体,内部的MEDPOR与外层软骨结合紧密。组织学可见成熟软骨陷窝并渗入MEDPOR孔隙内部、异染基质及Ⅱ型胶原表达。结论上述结果提示,可于体内构建特定形态、组织学良好的MEDPOR-软骨复合体。
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关键词:缺氧缺血性脑损伤 动物模型 C57小鼠 病理
目的:通过对模型的制备模拟新生儿围产期缺氧缺血性脑损伤,来研究其病理变化,为后期治疗提供了重要信息。方法:结扎7日龄新生小鼠右侧颈总动脉,置于8%低氧浓度和37℃环境温度下,分不同时间取出,送回母鼠身边继续哺乳,同时行病理检查。结果:在缺氧缺血30min,小鼠海马区出现病理改变,随着缺氧时间的延长病变范围逐渐扩大且加重。结扎侧的海马区为小鼠缺氧缺血时的最敏感部位,其次为大脑皮层和基底节区。结论:海马损伤先于大脑皮层和基底节,但缺氧90min整个鼠脑病理改变较明显,死亡率低,为研究新生儿围产期缺氧缺血性脑损伤提供了较为可靠的模型。
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