α-肿瘤坏死因子基因转染Tca8113细胞的实验研究
更新时间：2019-05-21
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作者联系方式：同济大学口腔医学院;上海第二医科大学;
会议名称：2004年上海市口腔医学学术年会
会议地点：中国上海
召开年：2004
出版社：上海市口腔学会
摘要：目的:探索头颈部鳞癌的α-肿瘤坏死因子基因治疗的可行性。方法:利用缺陷型逆转录病毒LXSN·TNF-α载体系统将TNF-α成功转导人舌癌细胞系Tca8113,用G418培养基筛选阳性克隆;并通过PCR法、ELISA法鉴定TNF-α的导入效率和表达水平,从中获得高分泌量的阳性克隆即转基因细胞Tca8113/TNF-α。对其进行如下分析:(1)通过流式细胞仪免疫荧光(FACS)法和体外细胞介导的细胞毒性实验(CMC)来检测转基因细胞的免疫原性。(2)通过ELISA法分析经60Co放射失活后制作的“瘤苗”的TNF-α基因的表达情况。(3)通过遗传毒理学实验技术-Ames实验对转基因细胞的细胞DNA和细胞培养上清液的致突变性进行评估。(4)统计学方法:多样本均数的方差分析方法。其中n=40,P<0.01,数据记录为(x±s)。结果:(1)PCR法检测出阳性克隆中存在有特异性的TNF-α和neo5基因片段;ELISA法检测出阳性克隆的TNF-α的分泌量(x±s)平均高达(110±5.62pg/ml/105细胞/24小时),而未转基因Tca8113细胞中未检测出TNF-α(P<0.01)。(2)FACS显示转基因细胞HL...
