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问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核、原核表达系统的构建

更新时间:2019-05-21 访问次数:7
作者:冯春燕郭晓奎
作者联系方式:上海交通大学医学院病原生物教研室;
会议名称:上海市预防医学会第二届学术年会
会议地点:中国上海
召开年:2006
出版社:上海市预防医学会
摘要:【目的】构建问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核及原核表达系统。【方法】采用连接引物通过PCR构建融合基因Lip21-LipL32,分别与相应的真核载体pVAX1及原核载体pET28b连接,真核重组质粒转染HEK293细胞,Western Blot检测其在真核细胞中的表达。原核重组质粒转入大肠杆菌BL21,用IPTG诱导重组蛋白表达,Western Blot检测表达蛋白的特异性。【结果】成功克隆出融合基因Lip21-LipL32的真核及原核重组质粒,表达产物经Western Blot检测验证了其特异性。【结论】成功构建Lip21-LipL32的真核及原核重组质粒,为进一步研究其免疫反应性,为融合基因DNA疫苗和蛋白疫苗的研制奠定了良好的基础。