PBL HLA-A mRNA表达的一步法FQ-PCR的建立及初步应用
更新时间:2019-05-21
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作者联系方式:山东大学齐鲁医院检验科;
会议名称:第四届全国临床检验学术会议
会议地点:中国湖北武汉
召开年:2006
出版社:中华医学会检验分会
摘要:目的通过建立宿主外周血淋巴细胞(PBL)表面HLA-AmRNA表达程度检测的一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,检测肾移植患者移植后外周血淋巴细胞表面HLA-AmRNA的表达程度,并探讨与移植后早期排斥反应的发生及机体免疫状态的关系。方法以G6PDH作内参照,用Taqman探针荧光定量技术,建立检测PBLHLA-AmRNA的一步法FQ-PCR方法;并检测35例随访移植病人的不同时间的60个标本和60例正常人的阈循环数(Ct),然后用REST软件分析PBLHLA-AmRNA的表达水平。结果正常人和51个移植标本的PBLHLA-AmRNA对G6PDH的相对表达量分别是0.036±0.012和0.026±0.015(P<0.05),提示服用免疫抑制药(目前临床用药剂量均偏大)后患者PBLHLA-AmRNA表达减弱,机体免疫状态低,无排斥反应发生但易导致感染、肿瘤等并发症的产生;其中6个移植标本的PBLHLA-AmRNA对G6PDH的相对表达量是0.042±0.017(P<0.05),提示移植患者PBLHLA-AmRNA表达增强,经病例回访查询是5例移植病人在这期间有排斥反应(根据临床表现、肾功...