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脐带血
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通过胎山羊宫内移植转导有BCR-ABL基因的人造血干细胞途径建立人类慢性粒细胞白血病动物模型
为建立人类慢性粒细胞白血病(CML)大动物(山羊)模型,以观察转导BCR-ABL基因的人造血干细胞在大动物体内长期生存的潜能,从新鲜的人脐带血细胞中分离和纯化人CD34~+Lin~-造血干/祖细胞,然后将MSCV-BCR-ABL-IRES-GFP逆转录病毒载体感染CD34~+Lin~-。将2X10~4感染的CD34~+Lin~-细胞通过宫内移植途径注射到胎龄为45~55天的胎山羊腹腔中。胎羊出生后应用FACS、FISH和定量PCR等技术分析不同组织中GFP的表达状况。结
抗CD3抗体诱导的新生儿脐带血淋巴细胞信号传导的研究
关键词:新生儿 脐带血 信号传导 淋巴细胞
目的从TCR/CD3复合物信号传导的角度,研究抗CD3抗体、PMA和Iomomycin对新生儿脐带血淋巴细胞增殖及胞内钙离子浓度的影响,以及与PLCγ1表达的关系。方法利用[~3H]TdR掺入法检测淋巴细胞的DNA合成;利用荧光分光光度法检测淋巴细胞内钙离子浓度;利用蛋白印迹法检测PLCγ1的表达。结果应用抗CD3抗体或PMA+Ionomycin协同处理新生儿脐带血和成人外周血淋巴细胞,其DNA合成和胞内钙离子浓度均明显增高,并且新生儿脐带血淋巴细胞的DNA合成和胞内钙离子浓度明显低于成人外周血水平。但是,与抗CD3抗体相比,PMA+Ionomycin协同所诱导的新生儿脐带血淋巴细胞的增殖虽达不到成人外周血水平,但更接近成人外周血水平。抗CD3抗体处理前后的新生儿脐带血淋巴细胞PLCγ1的表达均明显低于成人外周血水平。结论新生儿脐带血淋巴细胞信号传导发育的不完善可能主要存在于细胞活化的早期阶段,并且这种不完善的原因可能与PLCγ1表达降低以及不能有效地被激活有关。
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