小檗碱
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目的：离体研究小檗碱是否可改善胰岛素抵抗。方法：以2-脱氧-D-[~3H]葡萄糖摄入法观察小檗碱对脂肪细胞葡萄糖转运的影响,以 western 印迹技术检测胰岛素信号和 AMP 活化的蛋白激酶(AMPK)活性。结果：在3T3-L1脂肪细胞,1和100nmol/L 胰岛素使3T3-L1脂肪细胞的糖摄取分别增加2．4倍和3．7倍,在100nmol/L 胰岛素和10umol/L 小檗碱都存在时,糖摄取增加6倍,明显高于10umol/L 小檗碱单独作用(3．6倍)。1nmol/L 胰岛素和0．1umol/L 小檗碱都存在时糖摄取增加3．7倍。3T3-L1脂肪细胞在10ng/m1 TNF-α孵育24h 后,基础葡萄糖转运增加,但胰岛素刺激葡萄糖转运下降,而小檗碱与胰岛素增敏剂曲格列酮相似,能对抗 TNF-α诱导的胰岛素抵抗。而 western 印迹结果显示,小檗碱并未增强胰岛素诱导的 Akt 磷酸化。另外,小檗碱增加一磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的磷酸化,然而小檗碱没未增加 AICAR 刺激的 AMPK 和 ACC 磷酸化。结论：小檗碱增加胰岛素刺激的葡萄糖转运,对抗 TNF-α诱...
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关键词：小檗碱 食管鳞癌 细胞周期停滞 H2AX磷酸化 c-myc
目的探讨小檗碱(berberine,Ber)对人食管鳞癌细胞株EC9706的生长抑制作用及其作用机制。材料与方法:用Ber作用E9706细胞后,采用光学显微镜观察细胞形态学变化,用MTT法检测不同浓度Ber在不同时间对EC9706细胞增殖的影响;采用TUNEL法和流式细胞仪Annexin-V Alexa 488/PI法检测Ber对EC9706细胞凋亡的影响;PI染色法检测经Ber作用后EC9706细胞周期分布的改变;用Western blotting检测Ber对EC9706细胞p53,c-myc,cyclin D1蛋白表达的影响;用免疫荧光方法检测由DNA双链断裂引起的H2AX磷酸化。结果Ber体外能显著抑制EC9706细胞的生长增殖,其抑制作用与药物浓度及作用时间呈正相关关系,作用48h EC9706细胞IC_(50)值约为50μM;Ber作用后DNA双链断裂明显升高,G2/M期细胞比例显著上调,但凋亡现象不明显;同时实验还发现Ber可以明显上调p53的表达并抑制c-myc和cyclin D1蛋白表达。结论Ber可诱发DNA损伤,并可通过细胞G2/M期阻滞而明显抑制EC9706细胞的增殖,上调野生型p53蛋...
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